水迷宮---慢性皮質(zhì)酮注射誘導(dǎo)焦慮性抑郁樹(shù)鼩模型的研究（二）

2 結(jié)果

1 自主活動(dòng)評(píng)分 正常組樹(shù)鼩非?；钴S，在籠內(nèi)不停上下翻轉(zhuǎn)或水平移動(dòng);  模型組活動(dòng)能力下降，跳躍次數(shù)明顯減少，總評(píng)分明顯低于正常組( P ＜ 0. 01) ; 給予言Y物文拉法辛干預(yù)后，樹(shù)鼩的活動(dòng)能力明顯提高( P ＜ 0. 01) ，見(jiàn) Fig 2

2.2  糖水偏好實(shí)驗(yàn)結(jié)果  如 Fig 3 所示，正常組樹(shù)鼩對(duì)蔗糖水的喜好度明顯高于普通蒸餾水。與正常組相比，模型組糖水偏好率明顯下降( P ＜ 0. 01) ; 給予**文拉法辛干預(yù)后， 糖水偏好率明顯增加( P ＜ 0. 05) 。

2． 3  Morris 水迷宮測(cè)試結(jié)果 如 Fig 4 所示，正常組樹(shù)鼩逃避潛伏期時(shí)間( EL) *短，目標(biāo)象限停留時(shí)間( ST) *長(zhǎng)，說(shuō)明正常組學(xué)習(xí)記憶能力均正常; 模型組樹(shù)鼩 EL 值明顯上升( P ＜ 0. 01) ，ST 值下降( P ＜ 0. 05) ，學(xué)習(xí)記憶能力較正常組均明顯下降; 給予文拉法辛干預(yù)后，EL 值下降( P ＜ 0. 01 ) ，學(xué)習(xí)能力提高，同時(shí) ST 值增加，記憶能力改善，但無(wú)明顯差異。

2． 4  血漿 CＲH、ACTH、COＲ 含量測(cè)定結(jié)果 如 Fig 5 所示，與正常組相比，模型組樹(shù)鼩血漿 CＲH、ACTH、COＲ 含量均明顯升高( P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ; 與模型組相比，文拉法辛組樹(shù)鼩血漿 CＲH、COＲ  含量明顯降低( P ＜ 0. 05 ) ，ACTH含量則無(wú)明顯變化。

2. 5  各腦區(qū)單胺遞質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果    如 Fig 6 所示，與正常組相比，模型組樹(shù)鼩海馬、前額葉皮質(zhì) 5-HT、NE、DA 含量均明顯降低( P ＜ 0. 05 或 P ＜ 0. 01) ; 杏仁核 5-HT、NE、DA 含量均下降，其中5-HT、DA 下降值有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P ＜ 0. 05) 。與模型組相比，文拉法辛組樹(shù)鼩海馬 5-HT、NE、DA 含量均明顯升高( P ＜ 0. 05) ; 前額葉皮質(zhì)、杏仁核各遞質(zhì)含量均呈上升趨勢(shì)，其中前額葉皮質(zhì) 5-HT 和 NE 含量明顯升高( P ＜0. 05) ，杏仁核 5-HT 含量明顯上升( P ＜ 0. 05) 。

3 討 論

焦慮性抑郁較單純的焦慮或抑郁更為復(fù)雜，本課題組前期開(kāi)展了焦慮性抑郁J病模型的相關(guān)研究，以嚙齒類動(dòng)物建立了焦慮性抑郁動(dòng)物模型。而嚙齒類與人類之間存在極大的種屬差異，因而需要建立非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型進(jìn)行補(bǔ)充。 靈長(zhǎng)類動(dòng)物在組織結(jié)構(gòu)、M疫、生理和代謝等方面與人類更近似，用其進(jìn)行焦慮性抑郁動(dòng)物模型的建立，更能模擬該病 的臨床發(fā)病特點(diǎn)，是評(píng)價(jià)該J病預(yù)防與Z療效果*有力的工具［9］。

樹(shù)鼩是一種分布于我國(guó)西南地區(qū)的小型哺乳類動(dòng)物，基 因組研究表明，樹(shù)鼩屬于靈長(zhǎng)類或是與靈長(zhǎng)類親緣關(guān)系*密 切的種屬，腦體質(zhì)量比高，具有較為發(fā)達(dá)的神經(jīng)系統(tǒng)和與人類相似的應(yīng)激系統(tǒng)［10］，因此，相比其他非靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型有不可替代的優(yōu)勢(shì)。文拉法辛是**各類抑郁癥( 包括伴有焦慮的抑郁癥) 及廣泛性焦慮癥的臨床一線用藥，因此，本實(shí)驗(yàn)選擇文拉法辛作為驗(yàn)證焦慮性抑郁動(dòng)物模型**預(yù)見(jiàn)性的 實(shí)驗(yàn)用藥。

本研究中，模型組樹(shù)鼩自主活動(dòng)評(píng)分明顯下降，符合焦 慮性抑郁患者不愛(ài)活動(dòng)的J病特點(diǎn)。同時(shí)，焦慮性抑郁模型 樹(shù)鼩對(duì)糖水的快感缺失、學(xué)習(xí)與記憶能力均下降，與患者的 臨床表現(xiàn)類似，在給予****后，模型樹(shù)鼩的行為表現(xiàn)均 好轉(zhuǎn)。綜合行為學(xué)測(cè)試結(jié)果，說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)焦慮性抑郁樹(shù)鼩模 型建立成功。

持續(xù)的 HPA 軸亢進(jìn)和腦區(qū)的神經(jīng)遞質(zhì)失調(diào)是焦慮性抑郁J病的重要發(fā)病機(jī)制之一［11］。本研究發(fā)現(xiàn)，模型組樹(shù)鼩存在一定的 HPA 軸高亢現(xiàn)象，在給予文拉法辛干預(yù)后，模型樹(shù)鼩的 HPA 軸高亢現(xiàn)象能得到一定的緩解。此外，本實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物多個(gè)腦區(qū)在焦慮性抑郁狀態(tài)下的單胺遞質(zhì)含量變化進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)各腦區(qū)單胺遞質(zhì)含量均呈現(xiàn)明顯的下降， 說(shuō)明該J病下腦內(nèi)單胺遞質(zhì)嚴(yán)重失調(diào)，可能是多個(gè)腦區(qū)協(xié)同發(fā)生的。文拉法辛作為 5-HT  和 NE 的再攝取抑制劑，能通過(guò)提高腦內(nèi) 5-HT 和 NE 濃度而發(fā)揮雙重抗抑郁作用［12］。本研究發(fā)現(xiàn)，文拉法辛對(duì)模型樹(shù)鼩各個(gè)腦區(qū)的 5-HT、NE、DA 含量均有一定的改善作用，其中對(duì)5-HT濃度的改變*為明顯，與文獻(xiàn)報(bào)道相符［13］。以上結(jié)果說(shuō)明，文拉法辛能夠逆轉(zhuǎn)  模型樹(shù)鼩體內(nèi)的 HPA 軸高亢以及腦區(qū)單胺遞質(zhì)失調(diào)等病理現(xiàn)象，由此可見(jiàn)慢性皮質(zhì)酮注射誘導(dǎo)的焦慮性抑郁樹(shù)鼩模型具有**預(yù)見(jiàn)性，是模擬焦慮性抑郁臨床發(fā)病特點(diǎn)的合適模型。

綜上，本實(shí)驗(yàn)以樹(shù)鼩為研究對(duì)象，采用慢性皮質(zhì)酮注射的方法，建立了一種更接近人類臨床的新型焦慮性抑郁動(dòng)物 模型，通過(guò)從動(dòng)物行為、神經(jīng)***等角度綜合評(píng)價(jià)，并進(jìn)行 **預(yù)見(jiàn)性研究，證明該模型是一種成功的、能模擬人類J病的焦慮性抑郁動(dòng)物模型。

( 致謝: 本實(shí)驗(yàn)主要在湖南中醫(yī)藥大學(xué)中藥粉體與****國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地完成，在此對(duì)實(shí)驗(yàn)室各位老師 及同學(xué)的幫助表示衷心的感謝! 特別感謝昆明樹(shù)鼩種質(zhì)資源中心提供的實(shí)驗(yàn)樹(shù)鼩及其飼養(yǎng)、衛(wèi)生管理、實(shí)驗(yàn)技術(shù)等! )